Qual é exatamente o propósito de lisar as células? As soluções "complicadas", como você diz, incluem um monte de ingredientes. O detergente está amplamente presente para dissolver as membranas celulares (que são baseadas em lipídios) e permitir a extração de proteínas ou outros compostos bioquímicos de dentro da célula (e organelas nos eucariotos). Existem também dois tipos de detergentes: iônicos e aniônicos. Ambos os tipos de detergente dissolvem as membranas, mas os detergentes iônicos tendem a ser mais severos dos dois, pois desorganizam fortemente as estruturas das proteínas.

Se a bioquímica das proteínas é importante, os próximos ingredientes mais importantes serão inibidores específicos de proteases: enzimas que degradam proteínas. Existem muitos deles, mas alguns exemplos incluem PMSF, EDTA, aprotinina, etc.

Às vezes, é necessário tamponar o pH da solução de lise para monitorar complexos de proteínas, ou manter a natureza de uma proteína, ou manter o DNA em uma faixa de pH ideal. Soluções gerais para tampões de lise incluem Tris-EDTA (TE), PBS, etc. Essa escolha se resume a se você deseja um tampão e em qual faixa de pH deseja manter sua solução de lise. Tampões comuns como TE e PBS são feitos para uma faixa de pH entre 7-8. Existem outros tampões que são usados ​​para faixas de pH baixas (pH 4-6), mas geralmente são menos comuns.

Por último, existem maneiras de lisar células sem usar qualquer tipo de tampão de lise. Um método é usar sonicação, que usa pulsos direcionados de som de alta frequência para lisar as células, cortando-as mecanicamente. Outro método é congelar-descongelar repetidamente as células de -80 ° C a 4 ° C (geralmente 3 vezes é suficiente). A lise dessa maneira é realizada pela formação repetida de cristais de gelo que cortam as células abertas, liberando seu conteúdo.

Se você tiver uma pergunta mais específica, um de nós pode orientá-lo mais, mas isso fornece uma visão geral do que está envolvido com os buffers de lise celular.

Eu me pergunto como você planeja medir a lise. Você encontrará muitos métodos de lise para E. coli incorporam um tratamento com lisozima e EDTA. Isso ocorre para que as camadas de lipopolissacarídeo (membrana externa) e de peptidoglicano do envelope celular possam ser rompidas antes que o detergente (geralmente SDS ou Triton X-100) seja adicionado para dissolver a membrana interna ou citoplasmática. Suspeito que se você adicionar detergente às células intactas, não seria particularmente eficaz, e quaisquer células afetadas permaneceriam como células desnaturadas que, por exemplo, ainda contribuiriam para a densidade óptica. geralmente são capazes de resistir aos sais biliares no intestino delgado, as bactérias Gram-negativas podem ser bastante resistentes aos detergentes. Por exemplo, muitas Enterobacteriaciae podem crescer em 5% SDS - ver:

Rajagopal, S et al . (2003) Oito bactérias Gram-negativas são 10.000 vezes mais sensíveis aos detergentes catiônicos do que aos detergentes aniônicos. Canadá. J. Mic. 49: 775-779